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文庫構(gòu)建-差減文庫
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技術(shù)待認(rèn)領(lǐng)

技術(shù)概述

差減文庫 ( Subtractive cDNA library) 也稱扣除文庫、差減cDNA文庫、抑制性消減文庫(Suppression Subtractive hybridization, SSH)。減法雜交的本質(zhì)是除去那些普遍共同存在的cDNA序列,從而使欲分離的目的基因的序列得到有效的富集,提高了分離的敏感性。

技術(shù)原理:是用兩種遺傳背景相同或大致相同而功能不同的材料 (如不同因素處理的細(xì)胞系或植物的近等基因系等) 提取mRNA (或反轉(zhuǎn)錄成 cDNA) ,在一定條件下用大大過量不含目的基因的一方為驅(qū)動(dòng)方(Driver) 與含有目的基因的試驗(yàn)方 ( Tester) 進(jìn)行雜交 ,選擇性地祛除兩部分共同基因雜交形成的復(fù)合物,將含有相關(guān)目的基因的未雜交部分收集后裝入載體形成文庫。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于將驅(qū)動(dòng)與試驗(yàn)樣品中的相同基因排除,而試驗(yàn)樣品中的差異基因得到了富集 ( Enrich) 。

(資料來源:寶吉生物,百度百科)

技術(shù)詳情

(XXX編輯,XXX修善)

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