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原位雜交
(In situ hybridization, ISH)
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技術(shù)待認(rèn)領(lǐng)

技術(shù)概述

原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交,來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。

原位雜交,或RNA原位核酸雜交(RNA nucleic acid hybridization in situ),又稱RNA原位雜交組織化學(xué)(RNA in situ hybridization histochemistry )或RNA原位雜交(RNA in situ hybridization, RISH)。該技術(shù)是指以標(biāo)記的核酸分子為探針,在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。

原位雜交技術(shù)是指以標(biāo)記的核酸分子為探針,在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以放射自顯影或免疫細(xì)胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進(jìn)行探測,從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子??梢詸z測 cRNA、miRNA、LnRNA、DNA??梢愿鞣N種屬的標(biāo)本,包括哺乳動(dòng)物、爬行動(dòng)物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。

FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域?;驹硎菬晒鈽?biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中最常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平的分析。熒光標(biāo)記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時(shí)使用多個(gè)探針,縮短因單個(gè)探針分開使用導(dǎo)致的周期過程和技術(shù)障礙。

(資料來源:百度百科)

技術(shù)詳情

(XXX編輯,XXX修善)

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